5.6 抗dsDNA抗体が結合するDNA模倣ペプチド
病原性抗dsDNA抗体の特異的な阻害剤を開発することは困難であった。 しかし、ペプチドはDNAの抗原性を模倣することができるため、抗dsDNA抗体の自己抗原への結合を、DNAとの結合部位の競合によって阻害することが考えられます。 したがって、ペプチドのDNA模倣物は、抗dsDNA抗体の腎臓（および／または他の臓器）への沈着と、それに伴う組織障害を防ぐことができるかもしれない。
ペプチドのエピトープがDNA構造を模倣しているという仮説は、in vitroの実験で初めて示されました。 R4Aは、IgG2bアイソタイプのマウス抗dsDNA抗体で、in vivoで投与すると、腎臓の糸球体に沈着し、組織学的損傷を引き起こす80。ペプチドディスプレイのファージライブラリを用いて、R4Aと特異的に反応するいくつかのペプチドが同定された81。 80
ファージライブラリ技術によって単離されたペプチドがミモトープ活性（エピトープの構造を模倣すること）を示すならば、オリジナルのエピトープによって刺激されるのと同様の抗体反応を引き起こすことになる。 ペプチドDNAのサロゲートが抗核自己免疫反応を引き起こすかどうかを調べるために、BALB/cマウスに多量体化したDWEYSVWLSNペプチドを免疫した。 驚いたことに、最初の免疫から約3週間後、もともと自己免疫のないこのマウス系統に、高力価のIgG抗dsDNA抗体が発現し始めた84。免疫されたマウスは、他の自己抗原に対する抗体も産生し、腎IgG沈着を示した。 82 したがって、ファージディスプレイで分離したペプチドを免疫することで、非自己免疫マウスに病原性ループス様の抗dsDNA反応を誘発することができる。 同様の実験で、3つのモノクローナルIgG2a抗dsDNA抗体が、NZB×NZW F1系統のループス傾向マウスから得られた83。これらの抗体によって選択されたペプチドは、ヒトSLE患者の血清抗体と結合することができた。 さらに、これらのペプチドを免疫したBALB/cマウスでは、血清中のIgG3抗dsDNA抗体が増加した83。したがって、ループスで起こるエピトープ拡散の理解に貢献するだけでなく、これらのペプチド誘発自己免疫モデルは、治療につながる可能性のあるブロック抗原の同定にも役立つ。 ペプチドを用いた受動的免疫療法は、抗体が標的臓器に結合するのを阻止し、その後の傷害を防ぐことに焦点を当てているため（保護免疫を妨げる非特異的な免疫抑制ではなく）、ループスの治療における新たな治療法として登場する可能性があります。
同様の実験が、ヒトのループス自己抗体を用いて行われました87。 アフィニティ精製されたポリクローナルなヒト抗dsDNA IgGは、15merのペプチドであるASPVTARVLWKASHVに特異的に結合することがわかりました。 ASPVTARVLWKASHVは、ELISAおよびドットブロットアッセイにおいて抗dsDNA抗体と結合し、抗dsDNA抗体の結合を阻害した87
前述のように、ALWは、同一の可変領域を共有するネズミの抗DNA IgG（PL9-11 IgG1、IgG2a、IgG2b、およびIgG3）のパネルによって選択された12merのペプチドである41。 PL9-11 IgGとDNA、ラミニン、腎細胞、ラット糸球体などの抗原との結合は、ALWとのプレインキュベーションにより有意に減少した。 さらに、アラニンスキャニングにより、ALWと抗DNA抗体の結合がアミノ酸配列特異的であることを確認した。 興味深いことに，マウスモデルとヒト患者の両方から得られたループス血清のdsDNAへの結合，そして重要なことに糸球体抗原への結合は，ALWペプチドによって著しく阻害された。 これまでに報告されたDNA模倣ペプチドは、単一のアイソタイプまたはループス血清によって選択されたが、ALWペプチドは4つのIgGアイソタイプすべてに結合し、in vivoでの病原性ポリクローナル抗DNA抗体反応をより広範に阻害するはずである41。 さらに、ALWは比較的中性のpI値（7.38）を持つため、他の分子との非特異的で不要な相互作用が少ないと考えられている。 さらに、我々の想定では、ループスに存在する病原性自己抗体は非常に多様で交差反応性があるため、異なるアプローチで選択された異なるペプチドの組み合わせが必要になるかもしれません。
確かに、異なる起源の抗dsDNA抗体を「餌」として用いることで、異なるペプチドを分離することができます。 すでに同定されているペプチドの間には構造上の類似性はあまりありませんが、興味深い現象として、DWEYSVWLSN（マウス抗体選択）とALW（ヒト抗体選択）の両ペプチドにおいて、トリプトファン残基が同様の位置に存在することが挙げられます。 これらのDNA模倣ペプチドの相対的な阻止効果を直接比較しても、残念ながらサイズの違いから明らかにはならない。 異なる研究で異なるペプチドが分離されたという事実は、スクリーニングプロセスで異なる抗dsDNA抗体が使用されたという事実によって説明されるかもしれない。 例えば、DWEYSVWLSNとASPVTARVLWKASHVは、それぞれネズミの抗dsDNA IgG2bモノクローナル抗体とヒトループス血清から精製した抗dsDNA抗体によって選択されました。 さらに、使用したファージライブラリの種類や複雑さも、ペプチドスクリーニングの結果に影響を与える可能性があります。
とはいえ、これらのペプチドはそれぞれ特定の抗DNAサブセットに結合する可能性があり、複数のペプチドを組み合わせて使用することで、より良い治療効果が得られる可能性があります。