ウイルスの核酸は、採取や取り扱い、保存が不適切だと不安定になるため、現在市販されている定量的な核酸検査キットの感度が低下します。 我々は、既知の不安定なC型肝炎ウイルスRNAを用いて、核酸の不安定性が核酸検査に与える影響を軽減するために、新しいプライマー設計戦略に基づく定量的RT-PCR法を開発した。 本法の性能は，直線性，検出限界，精度，特異性，および市販のC型肝炎ウイルス測定法との一致について評価した． また，本法の臨床応用について，2つの市販キット（CAP/CTM（Cobas AmpliPrep/Cobas TaqMan）およびKehua）と比較した． その結果、定量的RT-PCR法は、直線性R2 = 0.99、総検出限界（ジェノタイプ1～6）42.6 IU/mL（95% CI, 32.84 to 67.76 IU/mL）、CV 1.0.06±1.96 log IU/mL（範囲：-0.38～0.25 log IU/mL）で、CAP/CTM法との高い一致率（R2 = 0.97）を示しました。 本法は、不安定なC型肝炎ウイルスRNAを検出する上で、市販のアッセイよりも優れていました（P 0.05）。 この定量的RT-PCR法は、核酸検査におけるRNAの不安定性の影響を効果的に排除できる。 また、プライマーデザイン戦略の原理は、他のRNAやDNAウイルスの検出にも応用できると考えられます。