Het middelpunt van het Mob Museum is de rechtszaal op de tweede verdieping, waar in 1950 en 1951 een van de veertien hoorzittingen van de nationale Kefauver-commissie werd gehouden om de georganiseerde misdaad aan de kaak te stellen. Het museum heeft ook de bakstenen muur verworven waar het bloedbad op Sint-Valentijnsdag plaatsvond. Andere tentoonstellingen gaan over maffiageweld, geldroofoperaties in casino’s en afluisteren door de politie. In 2018 werd een nieuwe tentoonstelling genaamd Organized Crime Today toegevoegd aan de eerste verdieping na een grote renovatie.
De rondleiding begint op de derde verdieping waar de echte muur van het bloedbad van Valentijnsdag te zien is, en is toegankelijk met de lift of de trap. Bezoekers kunnen een film bekijken over de geschiedenis van de georganiseerde misdaad (beginnend rond de tijd van de afschaffing van de drooglegging). Het grootste deel van de tentoonstelling bestaat uit maffia-gerelateerde foto’s met onderschriften die de betekenis van de specifieke beelden uitleggen, maar ook met welke personen/gebeurtenissen ze in verband staan.
Het museum biedt een breed scala aan thematisch georiënteerde afdelingen die ingaan op de betrokkenheid van de maffia bij illegale activiteiten zoals gokken, drugs, prostitutie of smokkel en de inspanningen van de rechtshandhaving om deze criminele activiteiten tegen te gaan en te elimineren. Bovendien kan de bezoeker een aantal unieke, zelden toegankelijke stukken bekijken, zoals foto’s van slachtoffers van de beroemdste moorden die aan de maffia zijn toegeschreven (met de toepasselijke naam “Mob’s Greatest Hits”; deze zijn vrij grafisch van aard, omdat zij de echte lijken van de overledenen tonen), alsmede foto’s en korte biografieën van de populairste en beruchtste gangsterpersoonlijkheden. Een speciale muur bij de uitgang toont de beelden van alle acteurs die bekende gangsters hebben gespeeld in films of series. Een aanzienlijk aantal exposities is interactief; er zijn ook verschillende stations in het museum, waar relevante filmbeelden in een loop worden afgespeeld.
Er is een cadeauwinkel op de eerste verdieping. Met behulp van foto’s, tekst, displays, interactieve technieken, hands-on tentoonstellingen, en andere eersteklas museale methoden, leert de bezoeker over de geschiedenis van de georganiseerde misdaad, de drooglegging en de zakelijke mogelijkheden die het bood. Bezoekers leren over de eerste casino’s in Las Vegas, Howard Hughes, J. Edgar Hoover, het ontstaan van de FBI, Al Capone, Eliot Ness, en nog veel meer. Een bezoeker kan plaatsnemen in een replica elektrische stoel, luisteren naar echte draadtaps, trainen in een gebruik van geweld trainingssimulator en een interactieve misdaadlaboratoriumexpositie verkennen met betrekking tot forensische wetenschap.
In april 2018 opende het museum een volledig operationele speakeasy en distilleerderij in hun kelderexpositie, The Underground. De ruimte beschikt over exposities met betrekking tot de culturele geschiedenis van het tijdperk van het verbod, evenals de bootleggers, rumrunners en moonshiners die ervoor zorgden dat Amerikanen nog steeds toegang hadden tot drank tijdens de 13 jaar van federale drooglegging. Het museum distilleert zijn eigen 100-proef 100% maïs moonshine in een op maat gemaakte pot nog steeds gelegen in de Underground. In 2019 is het Mob Museum begonnen met de verkoop van zijn moonshine via Lee’s Discount Liquor-winkels in de Las Vegas Valley. De moonshine van het museum was voorheen alleen verkrijgbaar in The Underground.